Pengecatan Gram

Unknown

Bakteriologi

6 Januari 2013

Belum ada komentar

Maksud dari pengecatan ini adalah untuk mengetahui bentuk dan sifat bakteri terhadap pengecatan gram,yang berwarna merah termasuk kelompok bakteri yang gram negative sedangkan yang berwarna ungu adalah kelompok bakteri yang bersifat gram positif.

• ·   Persiapan

1.       Sediaan yang ingin di cat

2.       larutan karbol gentian /Kristal violet

a.       Kristal/gentian violet      1 gr

b.      Alkohol 95%                       10 ml

c.       Air Suling                             87 ml

d.      Fenol                                     3 ml

Kristal /gentian violet digerus dalam mortar sampai hancur,kemudian dilarutkan ke dalam alcohol dan ditambahkan air suling dan fenol, selanjutnya larutan ini disaring dengan kertas saring ke dalam botol yang berwarna dan disimpan pada tempat yang gelap.

3.       Alkohol 95%

4.       larutan lugol :

a.       iodium Kristal                     1 gr

b.      kalium yodida                    2 gr

c.       air suling                              300 ml

yodium dan kalium yodida digerus bersama dalam mortar dan ditambahkan sedikit demi sedikit sambil digerus sampai larut.

larutan ini di saring ke dalam botol yang berwarna dan sisa air suling dimasukkan semuanya melalui saringan tadi

5.       Larutan Air fuchsin

a.       basic fuchsin                      1 gr

b.      alcohol 95%                        10 ml

c.       air suling                              90 ml

basic fuchsin digerus dalam mortar sampai hancur,dilarutkan dalam alcohol kemudian air suling ditambahkan selanjutnya saring kedalam botol berwarna.

• ·   Cara pengecatan dan pembacaan hasil

1)      sediaan yang telah difiksasi dan dingin,dicat dengan larutan karbol gentian/Kristal violet selama 1 menit

2)      zat warna dibuang dan diganti dengan larutan lugol selama 1 menit

3)      laurtan zat warna dibuang dan sediaan dicuci dengan alcohol 96% sampai zat warna keluar.

4)      sediaan dicuci dengan air

5)      sdeian di cat dengan larutan fuchsin selama 30 detik

6)      sediaan dikeringkan,kemudian diperiksa pada mikroskop dengan memakai lensa imersi(lensa objektif 100x)

7)      diperiksa minimal 100 lapangan pandang,dilaporkan bentuk dan sifat bakteri terhadap pengecatan gram sert jumlah bakteri secara semi kuantitif.

negative(-)         :tidak ditemukan bakteri

+                             :jumlah bakteri kurang dari 100 dalam 100 LP

++                           :jumlah bakteri antara 100-200 dalam 100 LP

+++                        :jumlah bakteri antara 201-300 dalam 100 LP

++++                     :jumlah bakteri lebih dari 300 dalam 100 LP

Untuk bahan dari secret alat kelamin.maka diflokokus gram negative yang dilaporkan apakah intra atau ekstraseluler,sedangkan clue cell yang ada dilaporkan dalam jumlah persentase,sedangkan untuk specimen sputum jumlah dilaporkan rata-ratanya per lapangan pandang (objektif 10x dan okuler 10x)