- A. Persiapan
1) media isolasi(plat agar darah,coklat agar dan
mac. conkey agar)
2) ose terkalibrasi 10 ul
3) Salin steril
4) sputasi (oxoid)
- a)5 ml air suling steril digunakan unutk merekonstruksi 1 vial sputasol yang selanjutnya secara aseptic dilarutkan dalam 95 ml air suling steril
- b)4,5 ml di masukkan pada setiap tabung steril dan disimpan pada – 20o Ctahan sesuai dengan ezpired datenya(untuk pengecatan 1:10 ditambahkan sputum 0,5 ml)
- B. Cara kerja
1)sputum diencerkan dengan sputasol 1 :10,dikocok
dengan vortex sampai homogeny betul lalu diencerkan dengan salin menjadi 1 :100
2)pengenceran 1:100 ini dikocok terlebih dahulu
dengan vortex,kemudian diinokulasikan masing-masing kedalam plat agar
darah,coklat agar dan mac.conkey seperti pada specimen liquor
3)plat agar darah dan coklat agar di inkubasikan
pada suasana CO2 5% sedangkan mac.conkey agar perlu inkubasi biasa
35-37oC selama 18-24 jam,jika perlu sampai 2 kali 24 jam.
4)jumlah bakteri yang tumbuh pada setiap medium
isolasi dikalikan dengan 104untuk memperoleh jumlah bakteri per ml
sputum
5)karena dalam sputum terdapat banyak jenis
bakteri yang komensal maka yang dilaporkan adalah maksimal 2 garis bakteri
terbanyak jumlahnya(masing-masing dilaporkan jumlahnya)
6)pada sediaan gram jumlah rata-rata PMN perlapangan
pandang(objektif 10 dan okuler 10)sputum yang baik rata-rata sel PMN adalah
lebih dari 25 sel per LP